Establishing th reference range for t lymphocyes subpopulations in adults andd children from Brazil / Estabelecimento de valores de referencias para subpopulacoes de linfocitos T em adultos e criancas no Brasil

SUMMARY In Brazil, the existing reference values for T-lymphocytes subsets are based on data originated in other countries. There is no local information on normal variation for these parameters in Brazilian adults and children. We evaluated the normal variation found in blood donors from five large Brazilian cities, in different regions, and in children living in Salvador, and Rio de Janeiro. All samples were processed by flow cytometry. The results were analyzed according to region, gender, and lifestyle of blood donors. A total of 641 adults (63% males), and 280 children (58% males) were involved in the study. The absolute CD3+, and CD4+ cells count were significantly higher for females (adults and children). Higher CD4+ cell count in adults was associated with smoking, while higher CD8+ count was found among female children. Higher counts, for all T-cells subsets, were detected in blood donors from southeast / south regions while those living in the northern region had the lowest values. Individuals from midwestern and northeastern regions had an intermediate count for all these cells subsets. However, these differences did not reach statistical significance. In Brazil, gender and smoking, were the main determinants of differences in T-lymphocytes reference values. .

RESUMO Os valores de referências de linfócitos T existentes no Brasil são baseados em dados originados de outros países. Não existem dados locais da variação normal para estes parâmetros em adultos e crianças brasileiras. Avaliamos a variação normal encontrada em doadores de sangue de cinco grandes cidades brasileiras em diferentes regiões e em crianças residentes em Salvador e Rio de Janeiro. Todas as amostras foram processadas por citometria de fluxo. Os resultados foram analisados de acordo com região, gênero e estilo de vida dos doadores. Um total de 641 adultos (63% homens) e 280 crianças (58% meninos) participaram do estudo. Valores absolutos de CD3+ e CD4+ foram significantemente maiores no gênero feminino (adultos e crianças). Maiores valores de CD4+ em adultos foram associados com tabagismo, enquanto que maiores valores de CD8+ foram encontrados entre crianças do sexo feminino. Adultos das regiões sul e sudeste apresentaram maiores valores absolutos para todas as células T enquanto que adultos da região norte, apresentaram menores valores. Indivíduos residentes no nordeste e centro-oeste obtiveram contagens intermediárias para todas as populações de células T. Entretanto, estas diferenças entre as regiões, não demonstraram diferença estatística. No Brasil, gênero e tabagismo foram os principais determinantes para diferenças em valores de referências de linfócitos T. .

Distribution of hepatitis C virus genotypes among different exposure categories in the State of Pará, Brazilian Amazon / Distribuição dos genótipos do vírus da hepatite C em diferentes categorias de exposição no Estado do Pará, Amazônia Brasileira

INTRODUCTION: Epidemiological studies concerning HCV genotypic distribution in the Brazilian Amazon are scarce. Thus, this study determined the patterns of distribution of HCV genotypes among different exposure categories in the State of Pará, Brazilian Amazon. METHODS: A cross-sectional study was conducted on 312 HCV-infected individuals belonging to different categories of exposure, who were attended at the HEMOPA, CENPREN and a private hemodialysis clinic in Belém. They were tested for HCV antibodies using an immunoenzymatic test, RNA-HCV, using real-time PCR and HCV genotyping through phylogenetic analysis of the 5' UTR. The population groups were epidemiologically characterized according to data collected in a brief interview or medical consultation. RESULTS: Genotype 1 predominated in all the different categories of HCV exposure. HCV genotypic distribution among blood donors comprised genotypes 1 (94 percent) and 3 (6 percent). All patients with chronic hematologic diseases had HCV genotype 1. The genotypic distribution in illicit-drug users comprised genotypes 1 (59.6 percent) and 3 (40.4 percent). In patients under hemodialysis, genotypes 1 (90.1 percent), 2 (3.3 percent), and 3 (6.6 percent) were detected. Finally, the frequency of genotypes 1 and 3 was significantly different between the groups: BD and DU, PUH and DU, PUH and PCHD and PCHD and DU. CONCLUSIONS: The genotypic frequency and distribution of HCV in different categories of exposure in the State of Pará showed a predominance of genotype 1, regardless of the possible risk of infection.

INTRODUÇÃO: Estudos epidemiológicos sobre a distribuição genotípica do HCV na Amazônia Brasileira são escassos. Baseado nisto, determinamos o padrão de distribuição genotípica do HCV em diferentes categorias de exposição no Estado do Pará, Amazônia Brasileira. MÉTODOS: Estudo transversal foi realizado com 312 indivíduos infectados pelo HCV, pertencentes a diferentes categorias de exposição atendidas pelo HEMOPA, CENPREN e uma clínica privada de hemodiálise em Belém. Eles foram testados quanto à presença de anticorpos anti-HCV por teste imunoenzimático, RNA-HCV utilizando PCR em tempo real e genotipados através de análise filogenética da 5' UTR. Os grupos de populações foram caracterizados epidemiologicamente de acordo com dados coletados em breve entrevista ou consulta de prontuários médicos. RESULTADOS: Em todas as diferentes categorias de exposição ao HCV, foram encontrados predomínio do genótipo 1. A distribuição genotípica do HCV em doadores de sangue (BD) foi constituída pelos genótipos 1 (94 por cento) e 3 (6 por cento). Todos os pacientes com doenças hematológicas crônicas (PCHD) possuíam genótipo 1. A distribuição genotípica em usuários de drogas ilícitas (DU) foi constituída pelos genótipos 1 (59,6 por cento) e 3 (40,4 por cento). Em pacientes em hemodiálise (PUH) foram detectados os genótipos 1 (90,1 por cento), 2 (3,3 por cento) e 3 (6,6 por cento). Finalmente, a frequência entre os genótipos 1 e 3 foi significativamente diferente entre os grupos: BD e DU, PUH e DU, PUH e PCHD, e PCHD e DU. CONCLUSÕES: A frequência genotípica e distribuição de HCV em diferentes categorias de exposição no Estado do Pará mostraram predominância do genótipo 1, independentemente do possível risco de infecção.

Likely transmission of hepatitis C virus through sharing of cutting and perforating instruments in blood donors in the State of Pará, Northern Brazil / Possível transmissão do vírus da hepatite C por compartilhamento de materiais cortantes e perfurantes em doadores de sangue no Estado do Pará, Norte do Brasil

We determined the risk factors for HCV infection in blood donors in the State of Pará, Northern Brazil. We examined 256 blood donors seen at the Blood Bank of Pará State between 2004 and 2006. They were divided into two groups, depending on whether they were infected with HCV or not; 116 donors were infected with HCV, while the other 140 were free of infection. The HCV-RNA was detected by real-time PCR. All of the participants filled out a questionnaire about possible risk factors. The data were evaluated using simple and multiple logistic regressions. The main risk factors for HCV were found to be use of needles and syringes sterilized at home (OR = 4.55), invasive dental treatment (OR = 3.08), shared use of razors at home (OR = 1.99), sharing of disposable razors in barbershops, beauty salons, etc. (OR = 2.34), and sharing manicure and pedicure material (OR = 3.45). Local and regional health authorities should educate the public about sharing perforating and cutting materials at home, in barber/beauty shops, and in dental clinics as risk factors for HCV infection.

Nós determinamos os fatores de risco à infecção pelo HCV em doadores de sangue no Estado do Pará, Brasil. Foram analisados 256 doadores de sangue atendidos na Fundação HEMOPA de 2004 a 2006, sendo divididos em dois grupos: infectados e não-infectados. O diagnóstico foi realizado por PCR em tempo real. Todos os participantes responderam a questionário sobre possíveis fatores de risco, sendo a modelagem estatística feita por regressão logística simples e múltipla. Os fatores de risco à infecção foram: uso de agulhas e seringas de vidros esterilizadas em casa (OR = 4,55), realização de tratamento dentário invasivo (OR = 3,08), compartilhamento de lâminas em domicílio (OR = 1,99), compartilhamento de lâminas descartáveis em barbearias, salões de beleza (OR = 2,34), e compartilhamento de material de manicure e pedicure (OR = 3,45). As autoridades de saúde devem conscientizar a população sobre o compartilhamento de materiais perfuro-cortantes em domicílio, salões de beleza e consultórios dentários como fatores de risco à infecção.

Caracterização molecular do HTLV-1/2 em doadores de sangue em Belém, Estado do Pará: primeira descrição do subtipo HTLV-2b na região Amazônica / Molecular characterization of HTLV-1/2 among blood donors in Belém, State of Pará: first description of HTLV-2b subtype in the Amazon region

Este trabalho objetivou a caracterização molecular do vírus linfotrópico de células T humanas infectando doadores de sangue atendidos na Fundação Centro de Hemoterapia e Hematologia do Pará. Amostras de DNA de 79 indivíduos soropositivos para o vírus linfotrópico de células T humanas foram analisadas por meio da reação em cadeia da polimerase para as regiões genômicas pX, env e 5'LTR, de polimorfismos de comprimento de fragmentos de restrição e do seqüenciamento da região 5LTR, com posterior análise filogenética, definindo o tipo e o subtipo do HTLV circulante na população estudada. Observou-se uma maior prevalência de HTLV-1 (71 por cento) em relação ao HTLV-2 (29 por cento). As amostras de HTLV-1 sequenciadas foram classificadas como pertencentes ao subtipo Cosmopolita, subgrupo Transcontinental, sendo as de HTLV-2 identificadas como HTLV-2c. A análise de polimorfismos de comprimento de fragmentos de restrição da região env e do sequenciamento da região 5'LTR, identificou, pela primeira vez na Amazônia Brasileira, uma amostra de HTLV-2b, enfatizando a necessidade de estudos moleculares contínuos na região para melhor entendimento da epidemiologia de transmissão do HTLV na população e permitir a vigilância epidemiológica da emergência de novos tipos e subtipos.

This study aimed to perform molecular characterization on the human T-cell lymphotropic virus (HTLV) infecting blood donors attended at the Hematology and Hemotherapy Center-Foundation of Pará. DNA samples from 79 HTLV-seropositive individuals were analyzed by means of the polymerase chain reaction on the pX, env and 5'LTR genomic regions; restriction fragment length polymorphism analysis; and sequencing of the 5'LTR region with subsequent phylogenetic analysis. From this, the HTLV types and subtypes circulating in the study population were defined. There was higher prevalence of HTLV-1 (71 percent) than of HTLV-2 (29 percent). HTLV-1 samples were classified as belonging to the Cosmopolitan subtype, Transcontinental subgroup; and the HTLV-2 samples as HTLV-2c. Analysis on the restriction fragment length polymorphisms of the env region and sequencing of the 5'LTR region identified a sample of HTLV-2b, for the first time in the Brazilian Amazon region. This emphasizes the need for ongoing molecular studies in this region, in order to have better understanding of the epidemiology of HTLV transmission in the population, and to enable epidemiological surveillance of the emergence of new types and subtypes.

Prevalência do TTV em doadores de sangue, na região metropolitana de Belém-Pará / Prevalence of the TTV in blood donors, in the metropolitan region of the Belém-Pará

O vírus transmitido por transfusão sanguínea (TTV), primeiramente relatado por Nishizawa et al. (1997), teve sua etiologia associada a casos de hepatites pós-transfusionais não esclarecidas ocorridas na China. Este vírus possui uma molécula de DNA de fita simples e características moleculares que o classifica como membro da família Circoviridae. Nosso estudo avaliou a prevalência do TTV em pacientes com risco de exposição parenteral como doadores de sangue, em 186 amostras. Os participantes foram submetidos a questionário socioepidemiológico e assinaram termo de consentimento. Foram realizadas extrações de DNA das alíquotas de soro das amostras coletadas e amplificadas por PCR em tempo real, com a finalidade de se analisar o genoma viral. Após amplificação, foi observada a frequência do TTV em cerca de 60 por cento dos doadores (111 por 186). Não foram observadas relações estatisticamente significantes entre a infecção pelo TTV e o gênero dos doadores (p igual a 0,670), uso de drogas endovenosas (p igual a 0,476), presença de tatuagem (p igual a 0,887), promiscuidade (p igual a 0,291) e uso de preservativos (p igual a 0,644). Nossos resultados nos levam a concluir que a frequência de TTV não foi representativa como responsável por quadro de hepatite em nossa amostra. Isto está de acordo com a ausência de referência clínica de hepatites virais em nossa amostra.

Detecção do citomegalovírus humano em doadores de sangue através de PCR em tempo real / Detection of human cytomegalovirus in blood donors by real-time PCR

O citomegalovírus humano (HCMV) é um agente infeccioso da família Herpesviridae. Neste trabalho, perquisou-se HCMV através da PCR em Tempo Real, em 115 amostras de DNA extraído de leucócitos de indivíduos voluntários para doação de sangue no Centro de Hemoterapia do Pará. A presença do DNA viral foi evidenciada em 57 por cento dos indivíduos estudados, sendo que dois terços deles eram do sexo masculino, não tendo sido observada nenhuma relação significante entre faixa etária, gênero e presença do DNA viral. Os resultados através da PCR em Tempo Real nos permitem sugerir que os bancos de sangue introduzam a identificação do HCMV na escolha das amostras de sangue com leucócito que serão utilizadas em pacientes imunodeprimidos e mulheres em início de gestação, pelo fato do HCMV ser um vírus teratogênico.

Carga proviral do HTLV-1 e HTLV-2: um método simples através da PCR quantitativa em tempo real / HTLV-1 and HTLV-2 proviral load: a simple method using quantitative real-time PCR

Os vírus linfotrópicos de células T humanas, quando integrados ao genoma da célula hospedeira, provírus, têm como marcador de replicação seu DNA proviral. A carga proviral parece ser um importante fator no desenvolvimento de patologias associadas a estes retrovírus. Neste estudo foi desenvolvida uma metodologia para quantificação absoluta da carga proviral dos HTLV-1 e HTLV-2 através da PCR em tempo real. Cinqüenta e três amostras de doadores de sangue com teste de ELISA reagente foram submetidas à metodologia, que utilizou o sistema TaqMan® para três seqüências alvo: HTLV-1, HTLV-2 e albumina. A quantificação proviral absoluta foi determinada através da proporção relativa entre o genoma do HTLV e o genoma da célula hospedeira, levando em consideração o número de leucócitos. O método apresentado é sensível (215 cópias/mL), prático e simples para quantificação proviral, além de eficiente e adequado para confirmação e discriminação da infecção pelos tipos virais.

When the human T cell lymphotropic virus (HTLV) is integrated with the host cell genome (provirus), its proviral DNA is a replication marker. Proviral load appears to be an important factor in the development of diseases related to these retroviruses. In this study, a methodology for absolute quantification of the HTLV-1 and HTLV-2 proviral load using real-time PCR was developed. Fifty-three blood donor samples with positive ELISA test result were subjected to this methodology, which utilized the TaqMan® system for three target sequences: HTLV-1, HTLV-2 and albumin. The absolute proviral load was quantified using the relative ratio between the HTLV genome and the host cell genome, taking into consideration the white blood cell count. The method presented is sensitive (215 copies/ml), practical and simple for proviral quantification, and is efficient and appropriate for confirming and discriminating infections according to viral type.

Leucemia mielóide crônica: novos rumos para diagnóstico e tratamento / Chronic myeloid leukemia: new pathways to diagnosis and treatment

Introdução: A Leucemia Mielóide Crônica (LMC) é uma expansão clonal da célula progenitora hematopoética, constitui 14 por cento de todas as leucemias e sua incidência é de 1,6 casos a cada 100.000 habitantes. O marcador molecular da doença é o cromossoma Philadelphia. Objetivo: Atualizar diagnóstico e tratamento, considerando métodos clássicos e técnicas avançadas como protocolo para LMC. Método: levantamento bibliográfico recente e relevante de fontes indexadas sobre o tema. Considerações Finais: Os avanços tecnológicos trouxeram mais especificidade e sensibilidade ao diagnóstico da LMC. A maior compreensão dos mecanismos de ação da doença tornou possível a fabricação de drogas de ação específica, possibilitando um tratamento mais eficaz